PCR擴(kuò)增原理高中(pcr擴(kuò)增原理)
哈嘍,大家好~~~我是小編田甜,關(guān)于PCR擴(kuò)增原理高中,pcr擴(kuò)增原理這個(gè)很多人還不知道,那么現(xiàn)在讓田甜帶著大家一起來(lái)看看吧!
1、基因的PCR擴(kuò)增技術(shù)原理類(lèi)似于DNA的變性和復(fù)制過(guò)程,即將待擴(kuò)增的DNA片段和與其兩側(cè)互補(bǔ)的兩段寡聚核苷酸引物,經(jīng)變性、退火和延伸若干個(gè)循環(huán)后DNA擴(kuò)增倍數(shù)可達(dá)2的n次方 倍。
2、 PCR反應(yīng)的基本成分包括:模板DNA(待擴(kuò)增DNA)、引物、4種脫氧核苷酸(dNTPs)、DNA聚合酶和適宜的緩沖液。
3、類(lèi)似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,其特異性依賴(lài)于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。
4、PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的高溫變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;②模板DNA與引物的低溫退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;③引物的適溫延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性-退火-延伸三過(guò)程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。
5、每完成一個(gè)循環(huán)需2~4分鐘, 2~3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。
本文分享完畢,希望對(duì)大家有所幫助哦。
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