哈嘍,大家好~~~我是小編田甜，關(guān)于反向pcr之所以能擴(kuò)增未知序列的原因在于，反向pcr擴(kuò)增質(zhì)粒這個(gè)很多人還不知道,那么現(xiàn)在讓田甜帶著大家一起來(lái)看看吧！

1、設(shè)計(jì)一對(duì)引物，針對(duì)基因兩端（覆蓋酶切位點(diǎn)），在上游引物中酶切位點(diǎn)后的一段序列中添加一個(gè)堿基，擴(kuò)增以后，酶切產(chǎn)物和空載體，再連接一遍，轉(zhuǎn)化，小提拿去測(cè)序。

2、最好上游換另一個(gè)內(nèi)切酶位點(diǎn)，這樣方便雙酶切檢測(cè)，區(qū)別于原來(lái)的質(zhì)粒。

本文分享完畢，希望對(duì)大家有所幫助哦。

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