哈嘍,大家好~~~我是小編田甜，關于質粒抽提，質粒這個很多人還不知道,那么現(xiàn)在讓田甜帶著大家一起來看看吧！

定義： 質粒是真核細胞細胞核外或原核生物擬核區(qū)外能夠進行自主復制的遺傳單位，包括真核生物的細胞器（主要指線粒體和葉綠體）中和細菌細胞擬核區(qū)以外的環(huán)狀脫氧核糖核酸(DNA)分子。

現(xiàn)在習慣上用來專指細菌(大腸桿菌）、酵母菌和放線菌等生物中細胞核或擬核中的DNA以外的DNA分子。

在基因工程中質粒常被用做基因的載體(Vector)。

許多細菌除了擬核中的DNA外，還有大量很小的環(huán)狀DNA分子，這就是質粒(plasmid)（補充：部分質粒為RNA）。

質粒上常有抗生素的抗性基因，例如，四環(huán)素抗性基因或卡那霉素抗性基因等。

有些質粒稱為附加體(episome)，這類質粒能夠整合進細菌的染色體，也能從整合位置上切離下來成為游離于染色體外的DNA分子。

目前，已發(fā)現(xiàn)有質粒的細菌有幾百種，已知的絕大多數(shù)的細菌質粒都是閉合環(huán)狀DNA分子(簡稱cccDNA)。

細菌質粒的相對分子質量一般較小，約為細菌染色體的0.5%～3%。

根據(jù)相對分子質量的大小，大致上可以把質粒分成大小兩類：較大一類的相對分子質量是40×106以上，較小一類的相對分子質量是10×106以下(少數(shù)質粒的相對分子質量介于兩者之間)。

每個細胞中的質粒數(shù)主要決定于質粒本身的復制特性。

按照復制性質，可以把質粒分為兩類：一類是嚴緊型質粒，當細胞染色體復制一次時，質粒也復制一次，每個細胞內只有1～2個質粒；另一類是松弛型質粒，當染色體復制停止后仍然能繼續(xù)復制，每一個細胞內一般有20個左右質粒。

這些質粒的復制是在寄主細胞的松弛控制之下的，每個細胞中含有10-200份拷貝，如果用一定的藥物處理抑制寄主蛋白質的合成還會使質?？截悢?shù)增至幾千份。

如較早的質粒pBR322即屬于松弛型質粒，要經(jīng)過氯霉素處理才能達到更高拷貝數(shù)。

一般分子量較大的質粒屬嚴緊型。

分子量較小的質粒屬松弛型。

質粒的復制有時和它們的宿主細胞有關，某些質粒在大腸桿菌內的復制屬嚴緊型，而在變形桿菌內則屬松弛型。

在生物學中的功能： 在基因工程中，常用人工構建的質粒作為載體。

人工構建的質?？梢约喾N有用的特征于一體，如含多種單一酶切位點、抗生素耐藥性等。

常用的人工質粒運載體有pBR322、pSC101。

pBR322含有抗四環(huán)素基因(Tcr)和抗氨芐青霉素基因(Apr)，并含有5種內切酶的單一切點。

如果將DNA片段插入EcoRI切點，不會影響兩個抗生素基因的表達。

但是如果將DNA片段插入到Hind III、Bam H I 或 Sal I切點，就會使抗四環(huán)素基因失活。

這時，含有DNA插入片段的pBR322將使宿主細菌抗氨芐青霉素，但對四環(huán)素敏感。

沒有DNA插入片段的pBR322會使宿主細菌既抗氨芐青霉素又抗四環(huán)素，而沒有pBR322質粒的細菌將對氨芐青霉素和四環(huán)素都敏感。

pSC101與pBR322相似，只是沒有抗氨芐青霉素基因和PstI切點。

質粒運載體的最大插入片段約為10 kb(kb表示為千堿基對)。

本文分享完畢，希望對大家有所幫助哦。

　　免責聲明：本文由用戶上傳，與本網(wǎng)站立場無關。財經(jīng)信息僅供讀者參考，并不構成投資建議。投資者據(jù)此操作，風險自擔。 如有侵權請聯(lián)系刪除！